欧美第三页,年轻的母亲2 韩国,亚洲国产中文字幕在线视频综合,BGMBGMBGM老妇视频

您好!歡迎訪問和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司網(wǎng)站!
咨詢熱線

18616108315

當(dāng)前位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 干貨分享 | 細(xì)胞凍存與復(fù)蘇避坑指南

干貨分享 | 細(xì)胞凍存與復(fù)蘇避坑指南

更新時間:2025-01-08      點擊次數(shù):874
  細(xì)胞凍存和復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng)中的關(guān)鍵環(huán)節(jié),直接影響細(xì)胞存活率和活力,關(guān)系到后續(xù)細(xì)胞實驗?zāi)芊癜凑沼媱澯行У剡M(jìn)行。要想做好細(xì)胞凍存和復(fù)蘇,首先請牢記下面這四個字:
 
  慢凍快融!
 
  1、為什么要慢凍快融?
 
  凍存細(xì)胞時,細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境中的水會形成冰晶。如果直接將細(xì)胞凍存到 -196℃ 的液氮中,由于凍結(jié)過程中胞外溶液中的水先結(jié)冰,使胞外溶液不斷濃縮,引起細(xì)胞電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水及蛋白質(zhì)變性等,會導(dǎo)致細(xì)胞受到機(jī)械性損傷。
 
  2、細(xì)胞凍存-讓你細(xì)胞安心沉睡
 
  3、細(xì)胞復(fù)蘇-讓細(xì)胞滿血復(fù)活
 
  ■ 細(xì)胞拿取
 
  盡量減少樣品從液氮或 -80℃ 取出到放置在解凍裝置中之間被動升溫的時間,否則會大大影響細(xì)胞活力。如果儲存裝置和解凍裝置相隔較遠(yuǎn),可使用裝有干冰 (-80°C) 或液氮 (-196°C) 的隔熱容器臨時保存和運送細(xì)胞。
 
  復(fù)蘇后第二天發(fā)現(xiàn)細(xì)胞沒有活?好不容易復(fù)蘇的細(xì)胞竟然污染了?怎么才能讓細(xì)胞滿血復(fù)活呢?繼續(xù)和小 M 一起往下看吧!■ 細(xì)胞拿取
 
  盡量減少樣品從液氮或 -80℃ 取出到放置在解凍裝置中之間被動升溫的時間,否則會大大影響細(xì)胞活力。如果儲存裝置和解凍裝置相隔較遠(yuǎn),可使用裝有干冰 (-80°C) 或液氮 (-196°C) 的隔熱容器臨時保存和運送細(xì)胞。(注意:從液氮中取細(xì)胞時要佩戴護(hù)目鏡和手套,謹(jǐn)防凍傷及凍存管爆炸!)
 
  ■ 解凍方式a) 解凍細(xì)胞時需要快速升溫 (50~100℃/min) 才能最大保存細(xì)胞活力,解凍方式是 37℃ 水浴[3]。從液氮或 -80℃ 取出凍存的細(xì)胞后,稍擰松管蓋,防止解凍過程中凍存管炸裂。放入 37℃ 水浴中,持續(xù)搖晃 1-2 分鐘直至解凍。
 
  通常建議在可見冰融化但樣品仍然冰冷(~0℃)時立即停止解凍,常見的做法是在只剩下一小片冰時從水浴鍋中取出樣品。升溫至室溫或更高溫度會增加冷凍保護(hù)劑的細(xì)胞毒性,這會極大影響細(xì)胞活力[1]。
 
  b) 不建議室溫解凍細(xì)胞,因為這會導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
 
  c) 為降低污染風(fēng)險,水浴解凍時凍存管管口要高于水面,避免水流入凍存管,水浴鍋中的無菌水也要定期更換。
 
  ■ 稀釋
 
  解凍后應(yīng)盡快稀釋,以減少 DMSO 的細(xì)胞毒性。按照培養(yǎng)基:凍存液 ≥10:1 的比例加入培養(yǎng)基進(jìn)行稀釋,然后離心并更換培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,這樣可以減少由滲透壓變化導(dǎo)致的細(xì)胞應(yīng)激。
 
  ■ 換液
 
  依據(jù)細(xì)胞狀態(tài),在細(xì)胞貼壁后或 24 h 后換液,繼續(xù)培養(yǎng)。
微信咨詢
地址:上海市浦東新區(qū)紫萍路908弄 傳真:021-50724961
©2025 和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有 All Rights Reserved.  備案號:滬ICP備2023007219號-1
久久久久久久久国产精品| 国产精品国产精品国产专区不卡| 免费播放很黄很色毛片| 中国人妻被黑人巨大征服| 成人免费无码视频在线网站| 欧美色图一区二区三区| 欧美一级片日韩一级片| 色综合AV综合无码综合网站| 国产汉服被啪福利在线观看| 久久这里精品| 国产精品久久久久9999赢消| 久久精品亚洲天堂| 亚洲AV无码成人精品区狼人影院| 亚洲av色香蕉一二三区| 上司揉捏人妻丰满双乳电影| 国产免费一区二区三区| 最好的2019国语中字| 人妻VA精品VA欧美VA| 果冻传媒播放观看免费| 日韩高清欧洲亚洲欧美| JAPANESE日本爆乳巨大| 日产日韩亚洲欧美综合搜索| 玄女心经在线观看免费高清完整版| 精品国产一区二区三区AV性色| 国产综合在线播放| 调教秘书跪趴撅起来打光屁股作文| 女特警被三四个黑人糟蹋| 狠狠色噜噜狠狠狠狠777米奇| 免费涩爱手機看片影視| 破了亲妺妺的处免费视频国产| 性欧美丰满熟妇XXXX性久久久| 国产欧美精品区一区二区三区| 萌白酱JK制服透明白丝喷水| 国产又色又爽又刺激在线观看| 日韩精品一区二区久久| 高潮迭起AV乳颜射后入| 久久久亚洲AV成人网站| 欧美一区二区视频在线观看| 欧美一区二区三区四区五| 色翁荡熄又大又硬又粗又| 日韩精品极品视频在线观看免费|