欧美第三页,年轻的母亲2 韩国,亚洲国产中文字幕在线视频综合,BGMBGMBGM老妇视频

您好!歡迎訪問(wèn)和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司網(wǎng)站!
咨詢(xún)熱線(xiàn)

18616108315

當(dāng)前位置:首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > PCR&q-PCR > 核酸定量測(cè)定 > AN54L029PikoGreen dsDNA quantitation reagent

PikoGreen dsDNA quantitation reagent

簡(jiǎn)要描述:PikoGreen dsDNA quantitation reagent(優(yōu)于PicoGreen)是一種極為靈敏的雙鏈DNA熒光染料,于雙鏈DNA的定量。測(cè)定DNA濃度在cDNA文庫(kù)構(gòu)建、DNA亞克隆、PCR產(chǎn)物估測(cè)等領(lǐng)域中非常重要,另外疫苗等生物制品中殘留微量DNA的檢測(cè)因關(guān)系人身健康,顯得尤為重要。

  • 產(chǎn)品型號(hào):AN54L029
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2024-08-06
  • 訪  問(wèn)  量:2103

產(chǎn)品分類(lèi)

Product Category

相關(guān)文章

Related Articles

詳細(xì)介紹

品牌其他品牌貨號(hào)AN54L029
規(guī)格1ML供貨周期現(xiàn)貨
主要用途在存在ssDNA、RNA和單體核苷酸的條件下,可以選擇性地檢測(cè)低至25 pg/m應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè)

產(chǎn)品描述

PikoGreen dsDNA quantitation reagent是一種極為靈敏的雙鏈DNA熒光染料,僅與DNA雙鏈結(jié)合后才發(fā)出熒光,且所產(chǎn)生的熒光與DNA濃度呈正比,在存在ssDNA、RNA和單體核苷酸的條件下,可以選擇性地檢測(cè)低至25 pg/mL的dsDNA。與傳統(tǒng)DNA定量方法相比,具有靈敏度高,特異性強(qiáng),耐受性好,線(xiàn)性范圍寬及方便操作等優(yōu)點(diǎn),適用于cDNA文庫(kù)構(gòu)建、DNA亞克隆、PCR產(chǎn)物等領(lǐng)域的DNA濃度的精確測(cè)定。相比傳統(tǒng)的方法,Pikogreen dsDNA Quantitation Reagent定量具有以下優(yōu)勢(shì):

  1. 靈敏:數(shù)量級(jí)較UV吸光讀數(shù)更敏感,可節(jié)省樣品。

  2. 特異性強(qiáng):只結(jié)合dsDNA,特異性強(qiáng),不受樣品常規(guī)污染影響。傳統(tǒng)紫外吸光法容易受樣品中存在的單鏈DNA,蛋白,RNA等影響。

  3. 耐受性好:耐受較高濃度的鹽、尿素、乙醇、氯仿、去垢劑、蛋白或瓊脂糖,可以直接定量PCR擴(kuò)增產(chǎn)物而無(wú)需從反應(yīng)混合物中純化DNA。

  4. 線(xiàn)性范圍寬:PikoGreen dsDNA染料測(cè)定DNA濃度,在100pg/ml-100ng/ml范圍內(nèi)呈良好線(xiàn)性;熒光計(jì)兼容。

  5. 容易使用:在樣品中加入染料,等待5~6 min染色,然后讀數(shù)即可,且適用于96和384孔板。與大多數(shù)基于熒光的酶標(biāo)儀和可適用于各種DNA樣品分析、PCR的分析、芯片樣品、DNA損傷分析、酶活性分析、基因組DNA定量以及復(fù)雜混合物中dsDNA的檢測(cè)和病毒DNA定量等多種領(lǐng)域。

該分析在四個(gè)數(shù)量級(jí)范圍內(nèi)呈線(xiàn)性,且?guī)缀鯚o(wú)序列依賴(lài)性,可以精確地測(cè)量多個(gè)來(lái)源的DNA,包括基因組DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。該方法因其穩(wěn)定性、靈敏性,已經(jīng)錄入《中國(guó)藥典》。
訂購(gòu)信息

產(chǎn)品名稱(chēng)貨號(hào)規(guī)格
PikoGreen dsDNA quantitation reagent(優(yōu)于PicoGreen)AN54L0291 mL

運(yùn)輸與保存
藍(lán)冰運(yùn)輸。-20℃避光保存,有效期24個(gè)月。
使用方法
1. PikoGreen工作液的配制
使用前將PikoGreen dsDNA定量試劑回溫至室溫;PikoGreen以100 µL 200×的濃縮液形式保存于無(wú)水DMSO中的(共10管)。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求用1×TE按1:200 的比例稀釋適量定量試劑濃縮液。例如要準(zhǔn)備足夠的操作溶液以2 mL檢測(cè)體系測(cè)定20個(gè)樣品,可向19.9 mL 1×TE 中加入100 µL PikoGreen dsDNA 定量試劑。工作液見(jiàn)光易降解,盡量在配好后幾小時(shí)內(nèi)使用。
2. 配制標(biāo)準(zhǔn)品DNA溶液
(1)用1 X TE溶液溶解dsDNA制備1 μg/mL dsDNA 。根據(jù)在1 cm 光程長(zhǎng)度的比色杯中A260 nm時(shí)的吸光度確定DNA 濃度;相應(yīng)于1 μg/mLdsDNA 溶液A260=0.02。標(biāo)準(zhǔn)液常用小牛胸腺DNA制備,PikoGreen 試劑測(cè)定法在通常污染核酸*劑的幾種復(fù)合物存在的條件下仍能保持線(xiàn)性良好,但是,為了得到有效的對(duì)照處理,被用來(lái)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的dsDNA 溶液要用和實(shí)驗(yàn)樣品相同的方式來(lái)處理,并且應(yīng)該包含相同的可能存在的污染物。
(2)制備從0.5 ng/mL 到500ng/mL(見(jiàn)表1)單重復(fù)8 個(gè)點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。配制一系列的標(biāo)準(zhǔn)DNA 溶液,然后與等體積的PikoGreen 工作液混和,放入1 x 1cm 比色杯中?;旌舷嗤w積的1 x TE 和PikoGreen 操作溶液作為空白對(duì)照,避光于室溫下放置2~5 min。

表1: 用1 x 1cm 比色杯時(shí)DNA 標(biāo)準(zhǔn)濃度配制參考

標(biāo)準(zhǔn)DNA 溶液濃度(ng/mL)標(biāo)準(zhǔn)DNA 溶液體積(mL)PikoGreen 工作液體積(mL)標(biāo)準(zhǔn)DNA 終濃度(ng/mL)
100011500
20011100
501125
201110
5112.5
2111
1110.5
011空白

(3) 當(dāng)用微量檢測(cè)皿適配器時(shí),PikoGreen 測(cè)定也可在較低的測(cè)定體積(50 μL 到200 μL)內(nèi)完成。產(chǎn)生從1 ng/mL 到100 ng/mL(見(jiàn)表2)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),配制一系列的標(biāo)準(zhǔn)DNA 溶液,然后與等體積的PikoGreen 工作液混和,將至少50 μL 溶液轉(zhuǎn)移到微量檢測(cè)皿中。確信不要在樣品中引入氣泡,輕輕地彈微量檢測(cè)皿的外部經(jīng)常可以驅(qū)散氣泡。避光于室溫下放置2-5 min。

表2:用微量檢測(cè)皿DNA 標(biāo)準(zhǔn)濃配制參考

標(biāo)準(zhǔn)DNA 溶液濃度(ng/mL)標(biāo)準(zhǔn)DNA 溶液體積(mL)PikoGreen 工作液體積(mL)標(biāo)準(zhǔn)DNA 終濃度(ng/mL)
2003030100
50303025
20303010
530302.5
230301
03030空白

(4) 孵育后用合適的熒光計(jì)測(cè)量樣品熒光值。Ex/Em=480 nm/520 nm,為了減少光漂白,應(yīng)保持所有樣品的檢測(cè)時(shí)間一致。用熒光值最大的樣品校正儀器。
(5)用檢測(cè)數(shù)據(jù)與DNA標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度做回歸分析,制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
3. 樣品分析
(1)用1 x TE 稀釋待測(cè)DNA 樣品至需要的體積(1x1 cm 比色杯需1.0 mL,微量檢測(cè)皿需25~100 μL)。對(duì)樣品高度稀釋可以確保任何污染物都被最大限度地沖淡。然而,也要避免取樣體積太小而無(wú)法精確吸取的情況。
(2)在每個(gè)樣品中加入等體積PikoGreen 工作液,混合好,將混合物移入合適的比色杯,避光于室溫下放置2~5 min。
(3)檢測(cè)、讀取熒光值,換算樣品中dsDNA濃度??梢詫?duì)樣品進(jìn)行不同的稀釋處理重復(fù)測(cè)定以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性。
注意事項(xiàng)

  1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

  2. PikoGreen定量試劑含有DMSO,PikoGreen 是結(jié)合dsDNA,操作時(shí)采取適當(dāng)防護(hù),戴手套小心操作。

  3. 盡管常見(jiàn)污染物不會(huì)影響PikoGreen 檢測(cè)dsDNA濃度(見(jiàn)表3),但是當(dāng)樣品中dsDNA濃度太低,RNA, ssDNA濃度超過(guò)dsDNA 10倍以上時(shí),RNA, ssDNA等污染還是會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生較大干擾,在此種情況下,RNA 酶可以消除RNA干擾, RNA 酶A、酶T1 、核酸酶S1 結(jié)合能除去ssDNA干擾,從而保證樣品熒光值是由dsDNA 產(chǎn)生。


表3:Pikogreen定量耐受的污染物列表

物質(zhì)名稱(chēng)最大耐受濃度信號(hào)變化百分比
Salts
Ammonium acetate50 mM3% decrease
Sodium acetate30 mM3% increase
Sodium chloride200 mM30% decrease
Zinc chloride5 mM8% decrease
Magnesium chloride50 mM33% decrease
Urea2 M9% increase
Organic Solvents
Phenol0.1%13% increase
Ethanol10%12% increase
Chloroform2%14% increase
Detergents
Sodium dodecyl sulfate0.01%1% decrease
Triton X-1000.1%7% increase
Proteins
Bovine serum albumin2%16% decrease
IgG0.1%19% increase
Other Compounds
Polyethylene glycol2%8% increase
Agarose0.1%4% increase


關(guān)產(chǎn)品推薦
2 x qPCR Mix(Green)(貨號(hào):AN11L918)
EZ ECL 化學(xué)發(fā)光液(增強(qiáng)型)(貨號(hào):AP34L014)





產(chǎn)品咨詢(xún)

留言框

  • 產(chǎn)品:

  • 您的單位:

  • 您的姓名:

  • 聯(lián)系電話(huà):

  • 常用郵箱:

  • 省份:

  • 詳細(xì)地址:

  • 補(bǔ)充說(shuō)明:

  • 驗(yàn)證碼:

    請(qǐng)輸入計(jì)算結(jié)果(填寫(xiě)阿拉伯?dāng)?shù)字),如:三加四=7
微信咨詢(xún)
地址:上海市浦東新區(qū)紫萍路908弄 傳真:021-50724961
©2024 和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有 All Rights Reserved.  備案號(hào):滬ICP備2023007219號(hào)-1
岳的下面又大又黑又肥| 亚洲午夜免费福利视频| 九一九色国产| 国产WW久久久久久久久久| 欧美精品久久久久久久久88| 欧美日韩亚洲激情| 日韩人妻无码精品一专区| 纯爱无遮挡H肉动漫在线播放| 亚洲人片在线观看天堂无码| 日韩国产在线观看| 17岁日本高清免费观看完整版中文| 欧美黑人性人禽猛交高清| 国产精品亚洲欧美日韩一区在线| 午夜精品久久久久久久无码| 亚洲精品在线电影| 国产精品久久久久永久免费看| 午夜免费啪视频 | 欧美日韩亚洲电影网在线观看| 国产精品青青青高清在线密亚| 国产精品99精品一区二区三区∴| 不卡无码人妻一区三区音频| 欧美精品日韩| 久久不射视频| 成人午夜影院| 欧产日产国产精品| 无码激情AV一区二区三区| 欧美丝袜一区| 国产精品日本一区二区不卡视频| 国产成本人片免费AV| 久久综合亚洲| 欧美日韩亚洲一级片| 国产精品欧美激情第一页| 神马午夜影院| CHINESE性内射高清国产| 久久精品国产亚洲7777| 国产又色又爽又刺激在线观看| 又粗又硬又大又深又爽动态图| 特殊按摩让少妇高潮连连| 新视觉| 99精品众筹模特自拍视频| 欧美日韩一区二区三区麻豆|